色谱法分离蛋白质水解液中18种氨基酸

 

摘要

 

氨基酸组成测定是蛋白质组学、食品质量检测以及药品质量检测中的重要分析项目。该分析项目涉及的化合物种类繁多,且需要柱前或柱后衍生技术,对分析方法和分析产品具有较高要求。本实验以异硫氰酸苯酯作为衍生剂对蛋白质水解液进行衍生,实验结果表明:采用Chromai Leaps高效液相系统进行氨基酸含量测定,能完全满足要求,方法准确、灵敏。

 

关键词

氨基酸、蛋白质、HPLC

 

色谱条件及谱图

 

仪器:Chromai Leaps高效液相色谱仪

色谱柱:C18,5μm,4.6mm×250mm

柱温:30℃

流动相:磷酸盐缓冲溶液(2.5gKH2PO4+2.5gK2HPO4溶于1L水中)/甲

流速:1.0mL/min

检测波长:254nm

进样体积:10μL

 

图1. 十八种氨对照品衍生后的色谱图

 

结论

 

本文使用 Leaps高效液相系统进行 PITC柱前衍生法测试氨基酸组成,检测速度快、方法灵敏;衍生方便、衍生物单一、稳定,检测结果准确。紫外检测(254mm)灵敏度高,一、二级氨基酸均可检测。本方法测定饲料、奶类、肉制品等氨基酸含量结果准确可靠。且仪器基线稳定,噪音小,完全满足分析要求。

 

 

 

 

创建时间:2020-12-02 14:27
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